離子色譜儀的工作過程是：輸液泵將流動相以穩定的流速(或壓力)輸送至分析體系，在色譜柱之前通過進樣器將樣品導入，流動相將樣品帶入色譜柱，在色譜柱中各組分被分離，并依次隨流動相流至檢測器，抑制型離子色譜則在電導檢測器之前增加一個抑制系統，即用另一個高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器，在抑制器中，流動相的背景電導被降低，然后將流出物導入電導檢測池，檢測到的信號送至數據系統記錄、處理或保存，如圖2所示。

圖2 典型離子色譜儀的工作流程圖

分離的原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子之間進行的可逆交換和分析物溶質對交換劑親和力的差別而被分離。離子色譜主要適用于親水性陰、陽離子的分離。分離機理主要是離子交換，細分起來有3種分離方式：高效離子交換色譜（HPIC）、離子排斥色譜（HPIEC）和離子對色譜（MPIC）。

三種分離方式的柱填料的樹脂骨架基本都是苯乙烯-二乙烯基苯的共聚物，但樹脂的離子交換功能基和容量各不相同。HPIC用低容量的離子交換樹脂，HPIEC用高容量的樹脂，MPIC用不含離子交換基團的多孔樹脂。3種分離方式各基于不同分離機理。HPIC的分離機理主要是離子交換，HPIEC主要為離子排斥，而MPIC則是主要基于吸附和離子對的形成。

高效離子交換色譜：應用離子交換的原理，采用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子，這在離子色譜中應用廣泛，其主要填料類型為有機離子交換樹脂，以苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架，在苯環上引入磺酸基，形成強酸型陽離子交換樹脂，引入叔胺基而成季胺型強堿性陰離子交換樹脂，此交換樹脂具有大孔或薄殼型或多孔表面層型的物理結構，以便于快速達到交換平衡。離子交換樹脂耐酸堿可在任何pH范圍內使用，易再生處理、使用壽命長，缺點是機械強度差、易溶易脹、受有機物污染。離子交換色譜是常用的離子色譜。

離子排斥色譜：主要根據Donnon膜排斥效應，電離組分受排斥不被保留，而弱酸則有一定保留的原理，制成離子排斥色譜主要用于分離有機酸以及無機含氧酸根，如硼酸根碳酸根和硫酸根有機酸等。它主要采用高交換容量的磺化H型陽離子交換樹脂為填料，以稀鹽酸為淋洗液。

離子對色譜：固定相為疏水型的中性填料，可用苯乙烯二乙烯苯樹脂或十八烷基硅膠(ODS)，也有用C8硅膠或CN，而流動相則由含有所謂對離子試劑和含適量有機溶劑的水溶液組成。對離子是指其電荷與待測離子相反，并能與之生成疏水性離子。對于化合物的表面活性劑離子，用于陰離子分離的對離子是烷基胺類，如十六烷基三甲烷等，用于陽離子分離的對離子是烷基磺酸類，

如己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉等。對離子的非極性端親脂，極性端親水，其CH₂鍵越長則離子對化合物在固定相的保留越強。在極性流動相中，往往加入一些有機溶劑，以加快淋洗速度，此法主要用于疏水性陰離子以及金屬絡合物的分離。

離子色譜儀雖然種類較多，但其工作流程基本大同小異。其流程主要為：

（1）對淋洗液系統進行必要檢查，打開氬氣氣瓶開關，調節減壓閥指示為0.2~0.3 Mpa；打開淋洗液系統氣源裝置，調節減壓閥，使指示表顯示為3~6 psi。

（2）分別按順序打開主機-電腦-打印機等設備電源開關，對設備進行上電操作。

（3）系統處理及控制系統上電接通后，進入操作界面，并進入系統操作面板，準備操作前的準備及管理工作。

（4）打開泵。如色譜分析儀長時間不使用或更換淋洗液后，要先打開平衡泵頭上的PRIME閥排氣后再開泵，待泵壓力穩定后再打開抑制器電源。

（5）在進入色譜柱之前通過進樣器將樣品導入, 流動相將樣品帶入色譜柱, 在色譜柱中各組分被分離, 并依次隨流動相流至檢測器。

（6）檢測器檢測到的信號送至數據系統，利用操作界面做完樣后，選擇檢測標準進入數據處理，對采集數據進行記錄、處理、打印或者保存等操作。

（7）關機，系統關機需要根據檢測樣品不同選擇不同關機步驟。對于陰陽離子，需要先將抑制器電流關掉，然后再關泵關機。

隨著科學技術的發展和人民生活水平的提高，離子色譜逐漸進入人們的視野。目前，離子色譜法已被應用于食品分析、藥物分析、環境監測等方面，且在化工、材料、農業等領域也有著較為廣泛的應用。

實例1：以硝酸鹽，亞硝酸鹽和磷酸鹽的形式存在的雜質污染，是普遍的水質問題。傳統的檢測方法具有許多缺點，檢測效果也是不盡如意。多年來，相關科研工作者已經開發了各種方法和分析系統來對水生環境進行實時的原位成分分析。然而，這些系統的使用和應用受到功率需求，尺寸，試劑使用或成本的限制。此外，電化學傳感器被廣泛用于快速分析水中的硝酸鹽和亞硝酸鹽。這些傳感器具有成本效益，但考慮其長期工作時，經常會因電極結垢和分析物隨時間的漂移而使其功能受到阻礙。迄今為止，基于離子色譜法的分析儀以及直接的紫外線吸收系統已被證明是實現原位硝酸鹽和亞硝酸鹽分析的主要途徑。

Murray等人^[4] 采用離子色譜儀對水中雜質進行了成分分析，基于簡單的陰離子交換方法，使用KOH洗脫液結合AG15保護柱來實現快速的陰離子分離。通過使用基于235 nm LED的吸光度檢測器，可以選擇性，直接地檢測亞硝酸鹽和硝酸鹽。作者選擇位于淡水和高污染廢水之間的50μL樣品定量環體積，連續分析包含15 mg L^-1 NO^3-和10 mg L^-1 NO^2-的陰離子標準液。依次進樣的色譜圖重疊時，儀器獲得的色譜圖重復性如圖3所示。在82次運行中，亞硝酸鹽和硝酸鹽的峰面積RSD值分別為3.87％和3.91％。發現亞硝酸鹽和硝酸鹽的保留時間RSD值分別為3.59％和3.23％，這表明了離子色譜在水質檢測中的突出應用價值。

圖3 82次連續運行后疊加的所選色譜圖

實例2：目前，農用硫酸銨的來源非常廣泛，包括己內酰胺副產硫酸銨、氨法脫硫副產硫酸銨、磷石膏轉制硫酸銨等不同行業的副產硫酸銨，這些副產硫酸銨中可能存在氟、氯、溴、硫氰酸鹽等雜質。有研究表明，氟離子含量過高會抑制玉米、大麥、小麥、豌豆、三葉草、菠菜的生長，造成作物減產；長期處在高濃度氯離子環境中，對氯敏感植物會導致死亡，對氯不敏感的植物也會造成一定的抑制作用；植物中溴離子含量一般在1~535 mg/kg，若土壤環境中溴離子含量過高，有可能對農作物造成危害；當硫氰酸根離子濃度大于5 mg/L時，對植物尤其是農作物就會產生危害。因此，農用硫酸銨作為一類氮肥，直接施用硫酸銨易使土壤板結，對土壤環境不友好，多用作復合肥料、摻混肥料等其他肥料產品的原料。為保障肥料產品質量，保障農作物安全，建立農用硫酸銨中雜質陰離子的檢測方法非常必要。

劉爽等人^[5]采用離子色譜法測定了農用硫酸銨中４種雜質陰離子。在樣品前處理時，需通過Ba離子柱過濾除去試液中的硫酸根離子。研究中Ba離子柱的容量為2.0~2.2 meq/ml，實驗過程中分別對未使用Ba離子柱凈化及使用該柱凈化的樣品進行測試，結果表明，未使用Ba離子柱凈化的樣品，SO₄^2-離子拖尾，嚴重干擾SCN-的測定，色譜圖如圖4左圖所示，無法計算加標回收率；使用Ba離子柱凈化的樣品，在保留時間20 min左右基線平穩，對SCN-的測定無影響，色譜圖如圖4右圖所示。經Ba離子柱凈化后樣品回收率在80.23%~111.5%，可滿足實驗室分析要求。利用本方法可以同時檢測農用硫酸銨中4種常見雜質陰離子含量，方法簡單、快捷、準確，因而值得推廣應用。

圖4 凈化前后樣品的離子色譜圖